海洋石油高效开发国家重点实验室“亮家底”

Q样品在XLD平板上的可疑菌落(菌落⑤和⑥)经生化和血清鉴定，结果为非沙门氏菌。

目前唐锋、周文斌、Zheng、Fang等课题组利用血清药物化学-网络药理学进行中药复方药效物质研究。2.5基于代谢组学的中药复方作用机制研究代谢组学是一门能快速阐明中药如何通过多器官、多系统、多靶点实现整体作用的学科，其全景式、整体互动性、综合性与中药多组分、多靶点、整体调节的特点及中医药理论的整体观、辨证论治不谋而合。

代谢组学样本主要来源于生物体的血浆、尿液、组织提取液，目前常用的代谢组学技术有UPLC-Q-TOF-MS、LC-Q-TOF-MS、LC-MS、GC-MS、质子核磁共振(1H-NMＲ)等，数据分析与模型建立主要借助多元统计学分析技术，包括主成分分析法(PCA)、偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)、正交最小二乘法(OPLS)、正交偏最小二乘法(OPLS-DA)等。目前，中药药效物质及作用机制研究已作为重点攻关内容列入国家中长期科学和技术发展规划纲要(2006-2020)、中医药创新发展规划纲要(2006-2020)和重大新药创制中，成为当今学术界关注的焦点问题之一，且随着中医药理论及疗效逐渐被西方世界接受，我们迫切需要加强中药现代化研究，全面分析中药有效物质及作用机制，为其国际推广、二次开发和临床应用奠定理论基础。但由于血清内源性物质和外源性中药复方成分复杂，对仪器的灵敏度、准确度要求较高，且主要阐明中药复方的药效物质，不涉及其作用机制的研究。代谢组学能通过其全景式、整体互动性、综合性的技术特点，利用血液、尿液等共同为机体提供非靶向的整体数据及潜在的生物标志物和代谢模式，以促进中药药物疗效的定量评价，并进一步探索潜在的作用机制。代谢组学的研究过程分为:样品制备;分离、检测与鉴定代谢产物;数据分析与模型建立。

而网络药理学可通过海量数据库资源和网络药理学研究工具，构建疾病-基因-靶标-药物之间相互作用的复杂生物学网络，对药物治疗疾病过程中的关键靶点和通路进行虚拟预测，弥补血清药物化学的不足相信随着现代分析技术的不断发展，中药复方作用机制的不断明确，中医证与现代药理学的不断磨合，谱效关系的研究能突破当前瓶颈，寻找出一条快速、准确、高通量的活性成分研究模式。（2）包合物的制备工艺芯材:用电子分析天平精密称取10mg莱藤素于试剂管中，加入少量无水乙醇使其充分溶解。

②按照1∶15的比例加入二氯甲烷，震摇5～10min。一、材料和方法1、仪器与设备FA2104电子天平：上海舜宇恒平科学仪器有限公司，MultifugeX1R台式高速冷冻离心机：美国ThermoScientific公司。根据下列公式计算包埋率﹔包埋率=（W3WW2）*100W%（11）式中：W1为制备的包合物质量/g：W2为小烧杯质量/g，W3为纯化后的包合物质量/g。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。

目前莱藤素胶囊类制剂已有研究，但是以HP-B-CD做壁材制备莱藤素包合物的研究尚无报道。（4）包合得率的测定方法用精密电子天平准确称取莱藤素的质量、HP--CD的质量以及包合物的质量，按以下公式计算包合得率。

壁材:按一定比例称取适量HP--CD，用10倍去离子水在60℃将其溶解。莱服素属于异硫氰酸酯，主要存在于萝卜籽中，与莱藤硫烷是同分异构体，但因莱藤素在结构上比莱藤硫烷多了一个双键，所以其抗氧化性能比莱藤硫烷约强1～2倍，同时也具有很好的异硫氰酸酯的其它性能。2、材料与试剂萝卜籽：籽粒饱满，不发霉（武汉蔬菜研究所），纯羟丙基--环糊精﹔二氯甲烷、无水乙醇、无水乙醚、碘化钾，以上试剂均为分析纯。二、结果与分析1、单因素试验（1）芯、壁材比对包合物的影响莱藤素（芯材）与HP--CD（壁材）的比例直接影响到包埋效果。

（2）包合时间对包合物的影响一定条件下，包合时间对包合得率及包埋率有影响。本文主要研究用HP-B-CD做壁材，莱藤素粗提物做芯材，通过单因素试验和正交试验制备莱藤素-HP-B-CD包合物，并用红外光谱进行表征，为莱藤素在食品及医用行业的应用提供依据。④在35℃的条件下旋转蒸发得到莱藤素粗提物。经检验莱藤素的纯度是60%。

3、试验方法（1）莱藤素的制备工艺流程：萝卜籽干燥粉碎脱脂碎渣加水酶解二氯甲烷浸提冷冻离心旋转蒸发莱葭素粗提物操作要点：①把去除油脂的碎渣加入一定量的水放在25℃的水浴锅中，酶解50min。真空抽滤后于冷冻干燥器中干燥，得莱藤素与HP--CD的包埋产物，放入冰箱中备用。

包合得率和包埋率随着芯、壁比的增大，呈现先增大后降低的趋势，在1∶7时达到最大，所以选择芯、壁比1∶7为最佳。TENSOR27红外光谱仪：德国Bruker公司。

（3）包埋率的测定方法准确称取莱藤素与HP--CD包合物（W1）至干燥的小烧杯中，加入20mL热水，搅拌使其溶解后，依次加入10mL无水乙醇、10mL无水乙醚和10mL石油醚萃取莱藤素。在众多种类的异硫氰酸酯中，研究较多的是存在于西蓝花中的莱藤硫烷，因其良好的抗氧化和抗癌作用，现已被开发生产为抗癌药物。但莱藤素的水溶性差、性质不稳定，限制了其在食品中的应用。③在10000r/min条件下，冷冻离心3min，取下层透明液体。重复萃取两次，合并萃取液移入恒重的小烧杯中（W2），蒸干溶剂至恒重，得到纯化后的包合物（W3）②按照1∶15的比例加入二氯甲烷，震摇5～10min。

莱服素属于异硫氰酸酯，主要存在于萝卜籽中，与莱藤硫烷是同分异构体，但因莱藤素在结构上比莱藤硫烷多了一个双键，所以其抗氧化性能比莱藤硫烷约强1～2倍，同时也具有很好的异硫氰酸酯的其它性能。包合:把芯材逐滴加入到HP--CD水溶液中，一定温度下包合一定时间后取出，待溶液冷至室温后，放在5℃冰箱中静置24h。

在众多种类的异硫氰酸酯中，研究较多的是存在于西蓝花中的莱藤硫烷，因其良好的抗氧化和抗癌作用，现已被开发生产为抗癌药物。经检验莱藤素的纯度是60%。

声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。重复萃取两次，合并萃取液移入恒重的小烧杯中（W2），蒸干溶剂至恒重，得到纯化后的包合物（W3）。

壁材:按一定比例称取适量HP--CD，用10倍去离子水在60℃将其溶解。其计算公式为：包合得率=W3/（W1+W2）*100%（1-2）式中：W1为莱藤素的质量/g，W2为HP--CD质量lg，W3为纯化后的包合物质量/g。一、材料和方法1、仪器与设备FA2104电子天平：上海舜宇恒平科学仪器有限公司，MultifugeX1R台式高速冷冻离心机：美国ThermoScientific公司。（5）包合物的红外光谱分析分别取适量的HP--CD、莱藤素、莱藤素与HP--CD的包合物和物理混合物，用溴化钾压片后于400～4000cm-1范围内进行红外吸收光谱扫描。

（3）包埋率的测定方法准确称取莱藤素与HP--CD包合物（W1）至干燥的小烧杯中，加入20mL热水，搅拌使其溶解后，依次加入10mL无水乙醇、10mL无水乙醚和10mL石油醚萃取莱藤素。目前莱藤素胶囊类制剂已有研究，但是以HP-B-CD做壁材制备莱藤素包合物的研究尚无报道。

如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：羟丙基--环糊精，二氯甲烷，溴化钾。在芯、壁比1∶7，包合温度60℃，不同包合时间条件下，制备包合物，试验结果如图2。

从图2中可以看出，随着时间的延长，包埋得率及包合率都有所增加，在2.5h时达到最大，随后又有所降低，所以，确定最佳包合时间为2.5h。本文主要研究用HP-B-CD做壁材，莱藤素粗提物做芯材，通过单因素试验和正交试验制备莱藤素-HP-B-CD包合物，并用红外光谱进行表征，为莱藤素在食品及医用行业的应用提供依据。

近年的研究表明，存在于十字花科植物中的异硫氰酸酯具有较强的抗癌、抗氧化功效，能有效抑制霉菌、酵母菌和细菌的活性，对寄生虫有杀灭作用﹔也有少量研究表明，异硫氰酸酯有降血脂、降血糖的作用，所以异硫氰酸酯在食品和医学领域都具有较好的应用前景。真空抽滤后于冷冻干燥器中干燥，得莱藤素与HP--CD的包埋产物，放入冰箱中备用。在60℃包合1.5h，按照不同的芯、壁材比例制备包合物，试验结果如图1。2、材料与试剂萝卜籽：籽粒饱满，不发霉（武汉蔬菜研究所），纯羟丙基--环糊精﹔二氯甲烷、无水乙醇、无水乙醚、碘化钾，以上试剂均为分析纯。

羟丙基-环糊精（HP-B-CD）水溶性强，在口服液制剂、缓释及靶向制剂、注射制剂等方面具有无可替代的优势，是一种理想的注射剂增溶剂和药物赋形剂。③在10000r/min条件下，冷冻离心3min，取下层透明液体。

根据下列公式计算包埋率﹔包埋率=（W3WW2）*100W%（11）式中：W1为制备的包合物质量/g：W2为小烧杯质量/g，W3为纯化后的包合物质量/g。④在35℃的条件下旋转蒸发得到莱藤素粗提物。

（4）包合得率的测定方法用精密电子天平准确称取莱藤素的质量、HP--CD的质量以及包合物的质量，按以下公式计算包合得率。二、结果与分析1、单因素试验（1）芯、壁材比对包合物的影响莱藤素（芯材）与HP--CD（壁材）的比例直接影响到包埋效果。